酶底物法检测操作步骤

西安海研生物的老师给大家分享一下酶底物法检测步骤流程详细的介绍，让您很快了解检测操作步骤。

第一步：将水样加入100ml取样瓶中，加入酶底物检测试剂拧开盖子摇均至完全溶解。

第二步：将样品加到定量检测盘中。

第三步：使用程控定量封口机对定量检测盘进行样品分配及封口。

第四步：放入恒温培养箱中培养，如需检测总大肠菌群或大肠埃希氏菌应在36±℃下培养，如需检测粪大肠菌群应在44.5℃下培养。

第五部：对照比色盘数阳性（显黄色）格子数，如需检测大肠埃希氏菌，则需用紫光灯照射黄色阳性格子显蓝色荧光为大肠埃希氏菌阳性。

第六步：按照使用的孔板类型，分别查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大肠菌群的菌群数。对照MPN表出数据。

第七步:根据样品稀释倍数，按照如下公式计算结果：大肠菌群（个/L）=MPN值×稀释倍数×1000ML/100ML。

定性检测

1、将试剂加入水样，并在36℃±培养24小时

2、结果:无色 阴性

黄色：总大肠杆菌群阳性

黄色且荧光：大肠埃希氏菌阳性

定量检测

1、将试剂加入水样，并混合均匀

2、倒入51孔定量检测盘（范围0~200MPN）或97孔定量检测盘（范围0-219MPN）

3、程控定量封口机后，在36℃±下，培养24小时

4、结果读取：

黄格：总大肠杆菌群

黄色且荧光格：大肠埃希氏菌

参照MPN表对照计数